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Efecto de las inmunoglobulinas de yema de huevo de gallina sobre la adherencia in vitro de Streptococcus mutans

   

        

 
   

Pérez Lozano, S.1; Chacana, P.2 & Terzolo, H.2

1Facultad de Odontología, UBA; 2Laboratorio de Bacteriología, INTA EEA Balcarce. Argentina

 

Entrevista realizada a la Odontóloga Soledad Pérez Lozano

 

 

Póster presentado en el Primer Congreso de Odontología del Mercosur - Sheraton Mar del Plata Hotel & Convention Center - 9 al 11 de Noviembre de 2006 - Mar del Plata, Argentina.
Obtuvo el Primer premio, Categoría Profesional, Trabajo Científico
Tesis de doctorado en la Universidad de Buenos Aires
Trabajos realizados en el INTA de Balcarce
 
 

Click para ver póster completo

  La etiología de caries dental es multifactorial. El Streptococcus mutans está asociado al comienzo de esta enfermedad. La adhesión bacteriana se relaciona con la interacción de proteínas de superficie o adhesinas. En presencia de sacarosa y mediante la acción de la enzima glucosiltransferasa, la bacteria sintetiza polisacáridos extracelulares insolubles (glucanos) que se acumulan en el biofilm oral y proveen múltiples sitios de unión para las “Proteínas fijadoras de Glucanos” de la pared celular de la bacteria, que permiten la adherencia y agregación (“biofim”) sobre la superficie dentaria.

La defensa inmunitaria específica contra S. mutans en la cavidad oral depende principalmente de anticuerpos (Ac) salivales asociados a otros mecanismos defensivos no específicos. Los anticuerpos de yema de huevo de gallina (IgY) contra S. mutans podrían ser utilizados para la profilaxis pasiva oral de caries en humanos. En este estudio se evaluó el efecto in vitro de la IgY contra S. mutans.          

Foto 1 - 2. Click para ampliar

Materiales y Métodos
 

Cultivo de S. mutans. Cepa S. mutans ATCC N° 35668 en tubos inclinados conteniendo caldo Cerebro Corazón con 5% de sacarosa (caldo CCS) a 37º C con 30% de CO2 durante 48 hs. Las colonias adheridas a las paredes del tubo (Foto 1) fueron resuspendidas con PBS pH 7,2 hasta obtener una absorbancia600 de 1,4.

Tratamiento con inmunoglobulinas. A partir de esta suspensión se realizaron diluciones seriadas en base 10 que fueron enfrentadas con igual volumen de una solución de IgY específica contra S. mutans o con PBS (control). Luego se sembraron en placas de agar Mitis Salivarius, incubadas a 37ºC con 30% de CO2 durante 48 hs (Foto 2).

Análisis de los resultados. Se registró el número de colonias adheridas a la superficie del agar, tanto para las suspensiones tratadas con IgY como para las incubadas con PBS.

Estos recuentos fueron comparados estadísticamente mediante un test de Student.

Foto 3 - 4. Click para ampliar

Resultados
 

Los valores de recuentos de UFC de las diluciones 10-4 y 10-5 se muestran en la Tabla 1. Cuando se compararon los valores obtenidos en las muestras tratadas con IgY con sus respectivos controles, las diferencias fueron significativas (en ambos casos P< 0,001). Se observaron diferencias en la morfología de las colonias cuando fueron tratadas con la inmunoglobulina (Foto 3); estas eran de mayor diámetro y se encontraban más agrupadas que las colonias no tratadas (Foto 4).
 

Dilución de Streptococcus mutans

Sin tratar con IgY Media UFC±SD

Tratado con IgY Media UFC±SD

10-4

336,50±36,66

53,750±8,95

10-5

47±6,68

25,75±3,50

 

Conclusiones
 

  • La presencia de IgY disminuyó significativamente el número de colonias de Streptococcus mutans adheridas.
     

  • Las diferencias morfológicas observadas entre las colonias tratadas y no tratadas con anticuerpos probablemente se deba al efecto aglutinante de los mismos.
     

  • Las IgY podrían emplearse en el estudio de la prevención de las caries en seres humanos.

 

 

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 P. A. Chacana, H.R. Terzolo, E. Gutiérrez Calzado, R. Schade (Octubre 2004)
 
Una introducción a la tecnología IgY, anticuerpos de yema de huevo
Lic. Pablo A. Chacana, Ph.D. Dr.Horacio R. Terzolo (Agosto 2003)

 
 

 

 

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