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Identificación de fuentes de resistencia a la podredumbre húmeda
del capítulo (Sclerotinia sclerotiorum): desarrollo y
evaluación de poblaciones para el mapeo de QTLs.
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C. Maringolo1,3, C.
Troglia1,2, P. Talia4,
V Nishinakamasu4, N. Paniego4,
R. Heinz4 y A. Escande2.
1Colaboraron de la misma manera,
2Unidad Integrada Balcarce INTA-UNMDP,
3PICTO Asagir-Agencia,
4INTA-Castelar. 1Colaboraron
de la misma manera.
cmaringolo@balcarce.inta.gov.ar;
ctroglia@balcarce.inta.gov.ar |
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Click para ampliar |
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INTRODUCCIÓN
La Podredumbre Húmeda del Capítulo del Girasol (PHC)
causada por Sclerotinia sclerotiorum es la segunda
enfermedad más importante del cultivo en la Argentina. La resistencia
a PHC es compleja y estaría determinada por grupos de genes (poligénica).
Sólo se han identificado fuentes de resistencia moderada (MR). | |
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OBJETIVOS
Caracterizar fenotípicamente la resistencia de
dos poblaciones de girasol y detectar microsatélites (SSR)
polimórficos en los padres. | |
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MATERIALES
Líneas parentales RHA 801 (MR), RK 416 (MR) y HA
89 [susceptible (S)].
Generaciones F1,
F2 y familias F2:3
derivadas de cruzamientos MR X S.
Microsatélites provenientes de INTA Castelar
(Paniego y col., 2002; Talia y col., 2005) y del mapa de ligamiento
consenso generado en Oregon State University (Yu et al, 2003). | |
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MÉTODOS
Inoculación de cada capítulo con 4000 ascosporas
/ capítulo.
Evaluación de la incidencia de la enfermedad
(porcentaje de plantas enfermas).
Extracción de ADN de las líneas parentales y de
119 plantas F2 según el protocolo
modificado de Shangai y Maroof, 1984.
Análisis de polimorfismo de SSRs mediante PCR +
geles de poliacrilamida. | |
Figura 1. Click para ampliar |
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RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Se detectó gran variabilidad entre las familias
derivadas del cruzamiento HA89 x RHA 801 y escasa variabilidad entre
las familias derivadas de HA89 x RK 416 (Figura1).
Del análisis de polimorfismos entre las líneas
parentales amplificaron 110 /140 SSRs. El 30% de ellos fue informativo
para al menos un par de padres (Tablas 1 y 2) y estuvieron
distribuidos en 14/17 grupos de ligamiento (Tabla 2).
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TABLA 1: Análisis de
polimorfismo de microsatélites desarrollados en INTA CASTELAR
(Paniego y col, 2002) obtenidos en parentales HA 89,K 416 y R RHA
801P: polimórfico, -: no analizado. |
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SSR HA |
HA89 |
HA89 |
SSR HA |
HA89 |
HA89 |
|
ID |
vs RHA 801 |
vs RK 416 |
ID |
vs RHA 801 |
vs RK 416 |
|
140 |
P |
|
3278 |
|
- |
|
196 |
|
P |
3330 |
P |
- |
|
293 |
P |
P |
3396 |
|
- |
|
360 |
|
|
3448 |
|
- |
|
432 |
P |
P |
3513 |
P |
- |
|
541 |
- |
|
3555 |
|
- |
|
557 |
- |
|
3581 |
P |
- |
|
806 |
|
- |
3582 |
|
- |
|
817 |
- |
|
3627 |
P |
- |
|
876 |
- |
P |
3652 |
|
- |
|
911 |
|
- |
3683 |
|
- |
|
928 |
- |
|
3700 |
|
- |
|
928,1 |
|
- |
3847 |
|
- |
|
969 |
- |
P |
3886 |
|
- |
|
991 |
P |
- |
3938 |
|
- |
|
1108 |
- |
|
4021 |
|
- |
|
1258 |
- |
P |
4074 |
|
- |
|
1752 |
- |
P |
4090 |
|
- |
|
2077 |
|
- |
4103 |
- |
- |
|
2191 |
|
- |
4105 |
|
- |
|
2579 |
- |
P |
4112 |
P |
- |
|
2714 |
- |
P |
4129 |
|
- |
|
3059 |
- |
P |
4193 |
P |
- |
|
3239 |
|
- |
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TABLA
2: Análisis de polimorfismo de microsatélites
del mapa consenso de ligamiento descripto por Yu y col. (2003). Número
de marcadores SSR informativos o polimórficos obtenidos en las líneas
parentales
RHA801 y HA89 por grupo de ligamiento.
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Grupo de Ligamiento |
SSRs Polimorficos |
|
I |
1 |
|
II |
3 |
|
III |
3 |
|
IV |
2 |
|
V |
3 |
|
VI |
0 |
|
VII |
2 |
|
VIII |
0 |
|
IX |
0 |
|
X |
3 |
|
XI |
1 |
|
XII |
1 |
|
XIII |
1 |
|
XIV |
1 |
|
XV |
1 |
|
XVI |
1 |
|
XVII |
1 |
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Si estos marcadores estuvieran relacionados con
la resistencia del girasol a PHC, esto indicaría la característica
poligénica de esta resistencia. La asociación de éstos y otros
marcadores con la caracterización fenotípica en el campo (Troglia y
col., 2005) permitirá la identificación de QTLs de resistencia, de
marcadores específicos para selección asistida y del tipo de
resistencia, y la combinación dirigida de fuentes de resistencia.
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CONCLUSIONES
- Existe gran variabilidad en la respuesta a
la PHC entre y dentro de las poblaciones en estudio.
- La proporción de familias de buen
comportamiento fue superior en aquellas derivadas del cruzamiento HA
89 x RHA 801.
- El nivel de polimorfismo entre las líneas
parentales coincide con el esperado en germoplasma de girasol
cultivado.
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REFERENCIAS
Paniego N, Echaide M, Muñoz M, Fernández L,
Torales S, Faccio P, Fuxan I, Carrera M, Zandomeni R, Suárez E Y, and
Hopp H E. 2002. Microsatellite isolation and characterization in
sunflower (Helianthus annuus L.) Genome 45: 3443.
Talia y colaboradores. 2005. (comunicación
personal)
Tang, S., Kishore, V. K. and Knapp S. J. 2003. PCR-multiplexes for a
genome-wide framework of simple sequence repeat marker loci in
cultivated sunflower. Theor Appl Genet (2003) 107:619.
Troglia C., Maringolo, C y Escande, A; 2005.
Poster HC 87. Congreso AAF, 2005.
Saghai-Maroof, M.A., Soliman, K.M., Jorgensen,
R.A., and Allard, R.W. 1984.
Ribosomal DNA spacer-length polymorphisms in
barley: Mendelian inheritance, chromosomal location, and population
dynamics. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81: 80148018. | |
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Financiado: INTA, Agencia (Piet),
ASAGIR, UNMdP
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31 de Mayo al 1o de Junio
Hotel Hilton - Buenos Aires |
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