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Aislamiento de Mycobacterium avium subsp.
paratuberculosis a partir de leches de consumo comercial.
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Cirone, K1,
Morsella, C.1, Gioffre, A.2,
Cataldi, A.2, Romano, M.2,
Paolicchi, F.1
1-Laboratorio de
Bacteriología, Área Producción Animal, Unidad Integrada INTA UNMdP,
CC 276, (7620) Balcarce, Argentina.
2-Instituto de Biotecnología, INTA
Castelar.
fpaolicchi@balcarce.inta.gov.ar |
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INTRODUCCION
Mycobacterium avium subsp.
paratuberculosis (Map) es el microorganismo
causante de la Paratuberculosis o Enfermedad de Johne, enteritis
crónica que afecta a animales domésticos y silvestres. Ha sido
vinculado como agente etiológico la enfermedad de Crohn que afecta al
hombre. Se ha sugerido que la principal vía de infección al humano
sería la ingestión de leche contaminada.
Ciertos trabajos demostraron que la
pasteurización es capaz de destruir las micobacterias, mientras que
otras investigaciones demuestran que Map podría resistir
diversos tratamientos térmicos. |
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OBJETIVO
Identificar la presencia de Map en leches
comerciales sometidas a distintos tratamientos térmicos. |
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Figuras 1, 2, 3 y 4. Click para ampliar |
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MATERIALES Y METODOS
Durante 7 meses se tomaron 50 ml de muestra de
leche mensualmente de 5 envases de 1 litro, de diferentes marcas
comerciales y sometidas a distintos tratamientos térmicos -
pasteurizadas (Past), ultra pasteurizadas (UP) y ultra alta
temperatura (UAT)-. Fueron centrifugadas, el pellet decontaminado con
hexadecilpiridinium (0.75%) y tratado con caldo/antibiótico. Se
sembraron 6 gotas de cada muestra en los medios de Herrold, con o sin
agregado de micobactina o adicionando piruvato y antibióticos
(Fig. 1).
Los cultivos fueron observados cada 15 días durante cuatro meses. Los
aislamientos fueron sometidos a: coloración por Ziehl Neelsen (ZN),
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) y búsqueda del polimorfismo
en el largo de los fragmentos de restricción (RFLP).
RESULTADOS
De 35 muestras de leche analizadas, Map
fue identificado en dos (5,7%) diferentes marcas comerciales de leche,
una Past y otra UAT. Las dos cepas mostraron con ZN la morfología
microscópica típica de Map (Fig.
2). Mediante PCR se identificó la banda de amplificación
característica de Map (IS900) en ambas muestras de ADN (Fig.
3). El análisis por RFLP reveló que ambas cepas pertenecen al
patrón "C” (Fig.
4). |
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CONCLUSIONES
- Es posible identificar Map viables
desde leches comerciales probablemente provenientes de animales de
rodeos lecheros con Paratuberculosis.
- Map sería capaz de resistir los
tratamientos térmicos a los cuales es sometida la leche.
- Este hallazgo pone de manifiesto el riesgo
al cual esta expuesta la población que consume estos productos
habitualmente y enfatiza la necesidad de controlar los sistemas
sanitarios en rodeos lecheros e industrias lácteas.
- Otros trabajos similares deberían ser
realizados en distintas zonas del país para evaluar la presencia de
Map en leche y en productos lácteos derivados.
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BIBLIOGRAFIA
- Grant I.R., Hitchings E.I, Ball H.J., Rowe
M.T. Impact of commercial HTST pasteurization
on Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in naturally infected
cow's milk; Appl
Environ Microbiol; 2002; 68(2): 602-607.
- Greenstein R. Is Crohon's disease caused
by a mycobacterium? Comparasions with
leprosy, tuberculosis, and Johne"s disease; The Lancet infectious
disease; 2003; 3: 507-513.
- Stabel, J.R. On-farm batch pasteurization
destroys Mycobacterium paratuberculosis in
waste milk; J Dairy Sci;2001; 84 (2):524-527.
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XVII Congreso Latinoamericano
de Microbiología
X Congreso Argentino de Microbiología
17 al 21 de octubre de 2004 / C.C. Gral. San Martín, Buenos Aires,
Argentina |
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