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Inoculación experimental con Neospora caninum en toros.

C. M. Campero1, D. P. Moore2, D. Cano1, M. R. Leunda1, A. C. Odeón,1

1Grupo de Sanidad Animal, INTA, CC 276, (7620), Balcarce, Argentina.  2Becario Conicet.

XIVa. Reunión Anual de la AAVLD (Asociación Argentina de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico) 13 al 15 de noviembre de 2002, Villa Gral. Belgrano, Sierras de Córdoba.

e-mail:ccampero@balcarce.inta.gov.ar

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Introducción 

Neospora caninum es un protozoo que tiene como hospedador definitivo al perro y como hospedadores intermediarios a los bovinos entre otras especies. N. caninum es morfológicamente similar a Toxoplasma - gondii, aunque está reconocido como una especie diferente. 

En los bovinos, la principal vía de transmisión es la congénita siendo motivo de investigación el rol de otras vías de infección post-natal.

La inoculación experimental de toros con ooquistes y taquizoítos de T. gondii, se logró el aislamiento a partir del semen entre los 14 y 84 días post inoculación. La probabilidad de que un toro transmita N. caninum horizontalmente a una vaca no ha sido investigada aún, siendo desconocido el rol epidemiológico de los toros en la enfermedad.

En nuestro país, existe información acerca de toros seropositivos a N. caninum (Campero, datos no publicados), 

Sin embargo no se ha establecido la presencia de alteraciones fisiopatológicas en el macho bovino infectado con este protozoo. 

Los objetivos de este trabajo fueron evaluar clínicamente toros experimentalmente inoculados con N. caninum y determinar la presencia de anticuerpos séricos y plasma seminal.

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Materiales y métodos

Animales: se utilizaron 3 toros de raza Hereford, con 5, 6 y más de 8 años de edad (A, B, C), respectivamente. Previo a la inoculación experimental, los sueros de los toros fueron evaluados mediante la prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFI) determinándose la presencia de anticuerpos anti N. Caninum. 

Inóculo: Se utilizaron taquizoítos de N. caninum de una cepa de referencia de (Nc-1) cultivados en células Vero. 

Momento y vía de inoculación: se administraron dos dosis con intervalo de 40 días.

En la 1º y 2º dosis se administraron 4.2 x 107 y 3 x 107 taquizoítos totales/toro, respectivamente. En ambas oportunidades el inóculo se aplicó a razón de 4 ml vía EV (vena yugular) y 4 ml vía IM (tabla del cuello).

Examen clínico: los toros fueron evaluados genitalmente mediante examen por palpación de los testículos, epididímos, cordón espermático, ganglios inguinales y glándulas sexuales accesorias. 

Determinación de anticuerpos: las muestras de suero se obtuvieron a los 15 y 40 días post-inoculación (dpi) de la 1º dosis, y a los 7 y 15 dpi de la 2º dosis. La muestra de fluido seminal se obtuvo mediante masaje de las glándulas sexuales accesorias a los 15 dpi de la 2º dosis. Los anticuerpos anti-N. caninum se establecieron mediante la prueba de IFIa partir de diluciones de 1:200 hasta título final. En el caso del plasma seminal se evaluó en forma similar pero a partir de material sin diluir y dilución 1:25.

Resultados

No se evidenciaron signos clínicos ni lesiones genitales a la palpación luego de dos meses de observación. La inoculación experimental por vía endovenosa e intramuscular de taquizoítos vivos de N. caninum a tres toros determinó el desarrollo de títulos serológicos. Con la técnica de IFI, no se evidenciaron anticuerpos anti-N. caninum en el plasma seminal. Los resultados obtenidos se resumen en la Tabla 1.

Tabla 1: Determinación de anticuerpos y examen clínico de toros inoculados experimentalmente con N. caninum. 

Toro

Título serológico

(Inversa de la dilución)

Anticuerpos en plasma seminal

Exámen
clínico

 

Pre-inoculación 

1oa

2ob

3oc

4od

 

 

A

400

1600

200

800

200

(-)

Normal

B

(-)

800

400

3200

400

(-)

Normal

C

(-)

400

800

1600

200

(-)

Normal

a: 15 dpi de la 1º dosis; b: 40 dpi de la 1º dosis; c: 7 dpi de la 2º dosis; d: 15 dpi de la 2º dosis

Discusión y conclusiones

En el presente trabajo no se detectaron alteraciones fisiopatológicas, sin embargo no se evaluaron posibles lesiones histopatológicas en el aparato reproductor. La inoculación de T. gondii en toros ocasionó fiebre y alteraciones cardiorrespiratorias identificándose el protozoo en vesículas seminales, epidídimo y testículo habiéndose aislado T. gondii del semen entre los 14 y 84 dpi. 

En el presente trabajo no se investigó la presencia de N. caninum en el semen de los toros inoculados. Por otro lado, la ausencia de anticuerpos anti N. caninum en el plasma seminal pudo deberse a que la técnica de IFI utilizada, la cual detecta sólo IgG, resultó incapaz de detectar IgA proveniente principalmente de las glándulas seminales.

Uno de los autores ha establecido la presencia de toros en servicio seropositivos a N. caninum. En este trabajo, 1 de los 3 toros tenía título serológico de 1:400 pre-inoculación. 

Mayores trabajos son necesarios para establecer el rol del toro en la edemiología de la neosporosis bovina, y establecer en que medida la enfermedad puede llegar a tener o no implicancias productivas y/o reproductivas.

 
 
 
 

 

 

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