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Introducción
La paratuberculosis es una enfermedad infecciosa causada por el Mycobacterium
avium subsp. paratuberculosis (Map) que afecta al ganado
bovino. La deficiencia de algunos minerales en sangre, como Cu, Se y Zn, y el exceso de
otros, como Fe, Mo y S, podría predisponer a su aparición.
Objetivo
Identificar bovinos infectados con Map, por
caracterización serológica y aislamiento del microorganismo en materia fecal, y
cuantificar el nivel de Cu, Zn, Fe y Se en sangre y además, la cuantificación de Cu, Zn,
Fe y Mo en el forraje y sulfatos (SO4) y sales totales (ST) en agua, para
relacionar la enfermedad con la concentración mineral.
Materiales y métodos
- Se trabajó con 75 animales adultos, de dos rodeos diferentes (R1 y
R2), obteniendo muestras de sangre y materia fecal
- La materia fecal fue sembrada individualmente a 37 ºC en tubos
conteniendo mycobactina con adición de piruvato y antibiótico, durante cuatro meses para
detectar crecimiento de colonias de Map. En el suero se realizó
el test serológico de ELISA (INTA) y el de Paracheck® (Pchk), para confirmar presencia
de seroreactores. Se cuantificó la concentración de Cu, Zn, Fe por espectrofotometría
de absorción atómica y Se, por actividad de glutatión peroxidasa (GSH- Px, Ec
1.11.1.9).
- Se muestreó el agua de bebida y el forraje.
- En el forraje se midió la concentración de Cu, Zn, Fe, y Mo.
- Se determinó el pH del agua de bebida, las ST por gravimetría y
la concentración de SO4 por turbidimetría
Resultados
De los 75 animales, 13 resultaron positivos (+) al ELISA y
11 (+) al Pchk, pero de éstos sólo 7 animales coincidieron en el resultado de ambos
ELISAs. Se aislaron 13 cepas de Map del cultivo de materia fecal, 6 cepas
provenientes de animales (+) a ELISA, 7 cepas provenientes de positivos en Pchk,
coincidiendo ambas pruebas positivas en 5 animales con aislamiento de Map.
De animales sospechosos (S) a ELISA, se aislaron 6 cepas de Map,
sin embargo otras 6 cepas provinieron de animales negativos (-) a Pchk. La cepa de Map
restante fue recuperada de un animal con serología (-) en ambas pruebas. De los (+) a
ELISA, 4/13 fueron deficientes en Cu y Se siendo 3 (+) a Map. De
los 29 animales (S) al ELISA, 14 presentaban deficiencias de Cu (3 (+) a Map),
mientras que 3 eran deficientes en Se (1 (+) a Map). De los
restantes 33 animales (-), sólo de 1 se aisló Map (el animal
presentó un valor de densidad óptica (DO) cercano a la DO de los animales que
presentaban título (S) a ELISA),mientras que 16 eran deficientes en Cu y 4 animales
presentaban deficiencia de Se. Los niveles de Fe, Zn y Hb de los animales eran normales,
Tabla 1. El contenido de Fe y Mo en la pastura fue elevado en ambos
rodeos.
Tabla 1: Resultados del ELISA,
cultivo bacteriológico y minerales en sangre. Los valores representan
la media, el desvío estándar, el rango entre paréntesis y el n de cada grupo.
| Total Nº
animales |
ELISAI |
Cultivo
Map |
Cu (µg/ml) |
Zn
(µg/ml) |
Fe
(µg/ml) |
GSH- Px
(UI/g Hb) |
Hb
(mg/
100 ml) |
| (+) |
(-) |
Bajo/
Marginal |
Normal |
Normal |
Normal |
Bajo/
Marginal |
Normal |
Normal |
| R 1
n=45 |
(+)=8 |
3 |
5 |
- |
0,9±0,31
(0,6-1,4)
n=8 |
1,6±0,27
(1,3-2,0)
n=8 |
1,4±0,17
(1,1-1,7)
n=8 |
22,3±8,50
(19-32) n=3 |
52,2±14,35
(38-72)
n=5 |
12,2±0,75
(11,6-13,8)
n=8 |
| (S)=21 |
5 |
16 |
0,4±0,12
(2,2-0,5)
n=6 |
0,8±0,15
(0,6-1,0)
n=15 |
1,4±0,39
(0,7-2,0) n=21 |
1,3±0,24
(0,9-1,9) n=21 |
34 ±
0,71
(33-34) n=2 |
56 ±
12,13
(42-88) n=19 |
12 ± 1,24
(10-15,6) n=21 |
| (-)=16 |
1 |
15 |
0,5±0,05
(0,4-0,5)
n=4 |
0,9±0,18
(0,6-1,3)
n=12 |
1,3±0,30
(0,7-2,1) n=16 |
1,3±0,21
(1,0-1,7) n=16 |
32±4,94
(28-35) n=2 |
55±13,78
(38-78) n=14 |
12,4±1,28
(10-14,4) n=16 |
| R 2
n=30 |
(+)= 5 |
3 |
2 |
0,4±0,11
(0,3-0,5)
n=4 |
0,7
n=1 |
0,8±0,13
(0,6-0,9)
n=5 |
1,3±0,14
(1,1-1,4)
n=5 |
16 n=1 |
49±7,74
(40-58)
n=4 |
14±1,00
(12,2-15,0)
n=5 |
| (S)= 8 |
1 |
7 |
0,4±0,08
(0,3-0,5)
n=8 |
- |
1,0±0,16
(0,8-1,4)
n=8 |
1,3±0,24
(0,9-1,5)
n=8 |
33
n=1 |
61±18,59
(40-94)
n=7 |
14±1,29
(11,3-15,6) n=8 |
| (-)=17 |
- |
17 |
0,4±0,11
(0,2-0,5)
n=12 |
0,7±0,08
(0,6-0,8)
n=5 |
0,9±0,12
(0,6-1,1)
n=17 |
1,2±0,14
(0,9-1,5)
n=17 |
32±1,41
(31-33) n=2 |
62±22,65
(40-120)
n=15 |
14±1,98
(11,3-20,7)
n=17 |
Los valores de Zn y Cu fueron normales en el forraje consumido por
el R2, siendo bajos los niveles de Cu del forraje del R1. En agua, las ST y los SO4
fueron normales, siendo su pH alcalino.
Discusión
Los bajos niveles de Cu (R1), los altos valores de Mo(ambos
rodeos), y en ciertos períodos con altos niveles de Fe en la pastura,
determinarían en los animales, una deficiencia primaria o secundaria de Cu.
Sin embargo en el R1, los niveles de Cu en sangre fueron normales
en el 80 % de los animales. Esto sugiere una movilización del Cu almacenado en hígado,
para mantener los niveles séricos normales, provocando un agotamiento en las reservas de
este mineral. Esto confirmaría que no existe una correlación entre niveles de Cu en
sangre y niveles en hígado. ?En el R2, la deficiencia de Cu encontrada en el 80 % de los
animales disminuiría la habilidad de los neutrófilos para fagocitar a los
microorganismos.
Habría una tendencia entre presencia de enfermedad y baja
actividad enzimática pues los valores más bajos se registraron en animales(+), con
sintomatología de paratuberculosis, siendo normales sus niveles de Cu en sangre.
Los SO4, y las ST no provocarían interferencias con el
metabolismo de Cu.
Conclusión
La deficiencia de Cu (primaria o
secundaria) y la deficiencia de Se, podrían afectar negativamente al sistema
inmunológico del animal y con ello la capacidad de respuesta a la infección con Map
predisponiéndo en los animales a la aparición de paratuberculosis.
Bibliografía
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avium subsp. paratuberculosis: pathogen, pathogenesis and diagnosis. Rev.
Sci. Tech. Off. Int. Epiz, 20(1):133-150.
-Ward, J. D., Gengelbach, G. P., Spears,
J. W. 1997. The effects of copper deficiency with or without high dietary iron or
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Interdepartmental Nutrition Program. 1400-1409.
-F.,Paolicchi; M.,Zumarraga, A.,Gioffre;
P.,Zamorano; C., Morsella; A., Verna; A., Cataldi; A.,Alito; M.,Romano. 2000.
"Utilización de diferentes métodos de diagnóstico de paratuberculosis en bovinos
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