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Introducción
El cobre (Cu), a través de su rol como cofactor de distintos
sistemas enzimáticos tiene una importante variedad de funciones biológicas en los
animales. La mayor parte del Cu sérico está unido a la ceruloplasmina oxidasa, (Cp) (Ec
1.16.3.1) la cual actúa como proteína transportadora. Otra enzima que tiene al Cu como
cofactor, es la superóxido dismutasa (SOD), (Ec 1.15.1.1) cuya función es actuar como
antioxidante protegiendo a las células del daño provocado por radicales libres. Cuando
se estudia la deficiencia de Cu, una de las mayores dificultades es seleccionar un
indicador práctico que pueda ser usado para evaluar el verdadero nivel de Cu del
organismo. El hígado, se sabe, es el mejor, pero posee ciertas limitantes en cuanto a su
muestreo y posterior procesamiento. La SOD, ha sido señalada por algunos autores como un
indicador más veraz que aquellos valores surgidos de la determinación del Cu sérico
total o de la actividad de la Cp. El objetivo del presente trabajo fue determinar la
concentración sanguínea y hepática de Cu, hierro (Fe), zinc (Zn) y molibdeno (Mo), y la
actividad en sangre de la Cp y SOD en bovinos deficientes en Cu.
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Cu ppm |
Zn ppm |
Fe ppm |
Mo ppm |
Cu unido ceruloplasmina ppm |
SOD
U/ml/gHb |
| Suero |
0.60 ± 0.24 |
1.072 ± 0.14 |
0.94 ± 0.26 |
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0.53 ± 0.23 |
2411± 843 |
| Hígado |
14.40 ± 13.60 |
180 ± 29 |
150 ± 54 |
2.84 ± 068 |
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Materiales y métodos
Se trabajó con sangre e hígado de 66 bovinos obtenidos en
matadero. De cada animal fueron muestreados aproximadamente 100g del lóbulo derecho del
hígado. El material fue secado en estufa a 60º hasta peso constante. Luego de
mineralizarlo por vía húmeda, se cuantificó el contenido de Cu, Fe, Zn mediante
espectrofotometría de absorción atómica (EAA). Por otro lado, el contenido de Mo, fue
determinado por colorimetría. A partir de muestras de suero se dosó Cu, Fe y Zn por EAA.
Así mismo en las muestras de suero sanguíneo se determinó la actividad de Cp. Para ello
se usó como sustrato la p-fenilendiamina, incubándose a la enzima a 37ºC durante 1 hora
a pH = 6.3. A partir de las muestras de sangre heparinizada, las cuales fueron
centrifugadas 15 minutos a 3500 rpm, se separaron los glóbulos rojos, los cuales luego de
ser lavados tres veces en medio isotónico fueron hemolizados. En este material, previa
dilución, se estimó el delta de actividad de la SOD por minuto, a 37º , pH =7, usando
como sustrato la xantina. La actividad de esta enzima se expresó, en cada caso, por gramo
de hemoglobina
Resultados
Los valores de Cu en hígado, indican que los animales presentaban
hipocuprosis. Las concentraciones de Fe y Zn en suero sanguíneo e hígado están dentro
de los parámetros normales. Los resultados obtenidos muestran que existe una correlación
positiva entre la concentración de Cu sanguíneo total, la actividad de Cp (r = 0.92,
p<0.0001) y la actividad de SOD ( r = 0.36, p<0.005). También se encontró una
correlación entre Fe y Zn en suero (r = -0.26, p<0.05). En hígado se obtuvieron las
siguientes correlaciones Cu-Mo (r = -0.29, p<0.05), Zn-Fe (r = 0.51, p<0.001). Entre
Fe en hígado y suero, se detectó un (r =-0.34, p<0.005). Sin embargo no se
encontraron correlaciones entre Cu total y Cp en suero versus Cu en hígado y SOD en
sangre versus Cu en hígado.
Discusión y conclusiones
La falta de correlación entre el Cu hepático y sanguíneo
confirman que el mejor indicador para detectar deficiencia de Cu es la concentración de
este oligoelemento en hígado. La correspondencia entre los valores de la actividad de Cp
y Cu sérico total coinciden con la bibliografía, la cual establece que entre un 90-95%
del Cu total se encuentra unido a la Cp. Finalmente, la baja correlación encontrada entre
la actividad de la SOD y la concentración de Cu sérico total, sumado a la falta de
concordancia con los valores de Cu hepático, sugeriría que esta enzima no aportaría,
según nuestros resultados, mejores elementos de diagnóstico para la identificación de
la deficiencia de Cu que los parámetros tradicionalmente estudiados.
Bibliografía
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