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Paolicchi, F.1,2;
Cipolla, A.1; Verna, A.1.3; Malena, R.1; Morsella, C.1;
Seguro, R.4; Gonzalez, A.5
1Laboratorio de Bacteriología, Departamento de Producción Animal, EEA INTA.
2Facultad de Ciencias Agrarias, UNMdP. CC276, (7620), Balcarce. Bs.As.
3CONICET. 4Asesoramiento Agropecuario "El Prado",
Esperanza, Santa Fe.
5Facultad de Veterinaria, UNL, Santa Fe. ARGENTINA.
XIVa. Reunión Anual de la AAVLD (Asociación Argentina de
Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico) 13 al 15 de noviembre de
2002, Villa Gral. Belgrano, Sierras de Córdoba.
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Introducción
La leche bovina proveniente de los tambos contiene microorganismos
cuya presencia es aceptada, siempre que se hallen en bajo número y puedan ser controladas
por la pasteurización (PT). Sin embargo, algunas bacterias patógenas como Brucella
spp, Mycobacterium spp o Salmonella spp constituyen un riesgo
zoonótico y modifican la calidad de la leche. La excreción de patógenos desde la
glandula mamaria de vacas infectadas, generalmente intermitente, resulta peligroso para la
transmisión de enfermedades a los terneros alimentados con leche en balde. La
eliminación por PT de estos agentes bacterianos evitaría la infección via oral
en los terneros criados en sistemas del tipo estaca.
Objetivo
Evaluar experimentalmente la eficacia de eliminación y control de
bacterias patógenas y no patógenas de la leche bovina recogida en el tambo y sometida a
tratamiento por PT.
Materiales y Métodos
Se utilizó un equipo de pasteurización de leche para terneros,
instalado en su propia fabrica en la localidad de El Trébol, Provincia de Santa Fé. El
régimen de PT fue de 300 litros de leche/hora, a 72,5 ºC de temperatura y con
modificaciones estructurales para variar los tiempos de PT. La leche (50 Lts)
proveniente del primer ordeñe de un tambo de la zona fue mantenida a 4ºC antes y
después de la PT hasta su procesamiento por los siguientes tratamientos: 1) PT
a 72,5 ºC por 15", 2) PT a 72,5 ºC por 30", 3) PT por 72,5 ºC
por 60". Se recolectaron esterilmente 200 ml de leche para el estudio bacteriológico
de leche cruda, leche inoculada y despúes de cada tratamiento desde la salida del equipo,
como se explica a continuacion: A) Leche cruda, B) Leche cruda sometida a PT
tradicional, C) Leche cruda post-inoculación (pi) con los siguientes cultivos: Escherichia
coli (3,3x108UFC/ml), Staphyloccocus aureus (8,8x108UFC/ml),
Streptococcus agalactiae (7,5x107UFC/ml), aislamientos
regionales provenientes de casos de mastitis bovina tipificados y seleccionados por su
mayor frecuencia de aislamiento, D) Leche cruda inoculada y sometida a PT a
72,5ºC/15", E) Leche cruda inoculada y sometida a PT a 72,5ºC/30", F)
Leche cruda inoculada y sometida a PT a 72,5 ºC/ 60". Los recuentos
bacterianos de los inóculos y de la leche pi se realizaron en duplicado por el método de
Miles y Misra por microdilución, sobre los medios Agar Sangre Columbia en placas de
Petri. Para la identificación microbiológica de las muestras de leche se cultivaron
aplicando los siguientes criterios: *Bacterias mesófilas: en medio
Plate-Count, siembra en diluciones en base 10 hasta la dilución 10-4,
incubándo las placas a 30ºC y 37ºC por 48 hs., *Coliformes totales y *Escherichia
coli:en medio VRB, y *Staphylococcus aureus:en medio
Baird Parker, con siembra en diluciones en base 10 hasta la dilución 10-4 e
incubación a 37ºC por 48 hs., *Brucella abortus en medio
Agar Skirrow, siembra directa por diluciones con ansa e incubación a 37ºC en jarra
conteniendo la mezcla gaseosa CO2, N2 y O2 mantenida por
15 días. *Salmonella spp: en caldo lactosado, con
pre-enriquecimiento en tetrationato y siembra posterior en medio XLD, siembra directa por
sub-repique del 1ro, 3ro y 5to días incubados a 37ºC por 6 días. *Hongos:
en medio Agar Papa con siembra directa por diluciones con ansa, incubándose las placas a
21ºC durante 5 días. *Micobacterias: en medio de Herrold-yema de huevo
con o sin micobactina y agregado de antibióticos. Las muestras de leche (n=2) tomadas
desde el tarro y desde la salida del equipo pasteurizador despúes de cada tratamiento,
fueron refrigeradas y realizado el recuento de viables (UFC/mL) y la siembra en medios
especiales, observados diariamente para las bacterias de rápido crecimiento y cada 15
días hasta los 4 meses por la presencia de micobacterias.
Resultados
Las muestras de leche cruda mostraron bajo conteo de
microorganismos como E.coli, S.agalactiae, Coliformes totales y bacterias
mesofilas, Tabla 1, pero fueron negativas a Salmonella sp, Brucella sp o
micobacterias patógenas. La PT durante 15" elimino o redujo la concentración
de los microorganismos presentes naturalmente y también aquellos inoculados
experimentalmente a la leche cruda. Además los tratamientos con la misma temperatura pero
durante 30" y 60" fueron igualmente efectivos para disminuir la carga
bacteriana.
TABLA 1. Muestra A: Leche cruda; Muestra
B: Leche cruda PT 72,5C°x15"; Muestra C: Leche cruda inoculada no PT;
Muestra D: Leche inoculada PT 72,5C°x15"; Muestra E: Leche inoculada PT
72,5C°x30"; Muestra F: Leche inoculada PT 72,5C°x60"; (NR: no
realizado).
| E.coli S.aureus S.agalactiae Colif.Totales Bact.Mesofilas
Brucella sp/Salmonella sp |
| Tipo de Muestra |
°C y
Tiempo PT |
UFC/ml |
UFC/ml |
UFC/ml |
UFC/ml |
UFC/ml
30°C 37°C |
UFC/ml |
| Muestra A |
-- |
(+) 75 |
(+) 3 |
NR |
(+) 85 |
4250 2250 |
(-) |
| Muestra B |
72,5°C/15" |
(-) |
(-) |
NR |
(-) |
435
70 |
(-) |
| Muestra C |
-- |
(+) 3,3x108 |
(+) 8,8x108 |
(+) 7,5x107 |
NR |
NR NR |
(-) |
| Muestra D |
72,5°C/15" |
(-) |
(-) |
(-) |
(-) |
815 125 |
(-) |
| Muestra E |
72,5°C/30" |
(-) |
(-) |
(-) |
(-) |
650 575 |
(-) |
| Muestra F |
72,5°C/60" |
(-) |
(-) |
(-) |
(-) |
795 355 |
(-) |
Conclusiones
Los resultados del estudio bajo estas condiciones, permiten afirmar
que la PT de la leche por cualquiera de los tratamientos es adecuada para eliminar
o disminuir la carga bacteriana en la leche destinada al consumo por terneros de tambo. La
mayor frecuencia de aislamientos bacterianos de la leche provenientes de tambos en
Argentina, le corresponde a los generos Staphilococcus spp, Streptococcus spp,
Escherichia coli, entre otros (1). El control de estos microrganismos en
leche destinada a la alimentación de terneros en guacheras, es de interés para asegurar
el consumo de leche con reducida carga bacteriana. Asimismo, bacterias como B.abortus
o micobacterias patógenas que se excretan por la glándula mamaria de bovinos infectados,
podrian ser eliminadas por PT antes que la leche destinada a la alimentación de
los terneros sea distribuída. Si bien en este estudio preliminar no se probó la
eliminación experimental de algunos patógenos bovinos, restaría comprobar la
susceptibilidad de ciertos microorganismos a la PT con las temperaturas a las que
fueron sometidas las muestras de leche. Asimismo, el control de bacterias productoras de
mastitis bovina halladas en leche cruda, contribuiría a disminuir la prevalencia de
infecciones mamarias que suelen expresarse en las terneras criadas en estaca y que se
alimentan de leche con alta carga bacteriana. De todas formas para evidenciar la
eficiencia de eliminación de otras bacterias patógenas y de riesgo zoonótico, otras
pruebas deberían realizarse con un diseño experimental similar y con un mayor número de
repeticiones durante un tiempo prolongado.
Bibliografía
1. Calvinho,L. 1999.
Análisis de leche de tanque de frío. Actas de X Jornadas de Salud Animal, Esperanza
Santa Fé. pp 1-6.
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